L'edizione 2013-2014 è stata la quarantatreesima edizione del campionato di Serie B femminile italiana di calcio, che da questa stagione riprende la denominazione tradizionale, diventando quindi il campionato cadetto dopo la Serie A.
Vi hanno partecipano 53 squadre divise in quattro gironi composti (ove possibile) su scala geografica: nord-ovest il girone A, nord-est il girone B, centro-nord quello C e centro-sud quello D. A causa di un numero dispari di squadre (53), i gironi non hanno numero uguale di squadre: il minimo, comunque, è di 12 mentre il massimo è fissato a 14. I gironi A e B hanno raggiunto il massimo numero di squadre consentito (14), il girone C la quota media (13), mentre il girone D la quota minima (12).
Le prime di ogni girone sono state promosse direttamente in Serie A, mentre per il secondo anno consecutivo non sono previste play-off tra le seconde classificate: questo perché, in base alla riforma dei campionati, la Serie A 2014-2015 prevede il passaggio da 16 a 14 squadre, comportando dunque ben 6 retrocessioni e solo 4 promozioni.
Le ultime dei quattro gironi sono state retrocesse in Serie C regionale, mentre altre quattro squadre sono state retrocesse tramite i play-out, ai quali hanno avuto accesso le terzultime e le penultime di ogni girone. I quattro play-out si sono disputati in gara unica sul campo della meglio piazzata in campionato. In caso di parità dopo i 90 minuti, si disputano due tempi supplementari da 15 minuti l'uno: in caso di ulteriore parità, si salva la squadra meglio classificata in campionato.
In tutti e quattro i gironi, in caso di scarto maggiore ai 9 punti tra due squadre che si sarebbero dovute affrontare nei play-out, questo non ha luogo e si considera già sconfitta (e dunque, direttamente retrocessa) la squadra distaccata di almeno 10 punti.
^Escluso dal campionato per aver rinunciato alle ultime due gare di campionato, era penalizzato di 2 punti in classifica. L'articolo 53 N.O.I.F. comma 4 assegna vinte alle altre squadre le ultime gare per 0-3 a tavolino togliendola dall'ottavo posto in classifica (il dodicesimo non è assegnato e il Caira non può retrocedere in Serie C perché le viene revocata l'affiliazione). Radiata dai ruoli federali, tutte le calciatrici sono state svincolate. Le ultime due squadre classificate vanno a disputare i play-off salvezza (D.C.F. Comunicato ufficiale n. 79 del 7 maggio 2014, pagina 6Archiviato il 25 settembre 2015 in Internet Archive.).